GIBCO胎牛血清的保存應(yīng)該要注意哪些要點(diǎn)呢?
更新時(shí)間:2020-03-27 點(diǎn)擊次數(shù):828次
GIBCO胎牛血清的保存應(yīng)該要注意哪些要點(diǎn)呢?
GIBCO胎牛血清來(lái)自牛胎兒通過(guò)屠宰場(chǎng)的封閉收集系統(tǒng)抽取的血液。胎牛血清是廣泛使用的用于真核細(xì)胞的體外 細(xì)胞培養(yǎng)的血清補(bǔ)充劑。這是因?yàn)樗哂蟹浅5退降目贵w并含有更多生長(zhǎng)因子,從而允許在許多不同細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用中的多功能性。
胎牛血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、激素、無(wú)機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。
GIBCO胎牛血清的作用:
1、提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。
2、提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類(lèi)、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。
3、有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。
4、是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源。
5、起酸堿度緩沖液作用。
6、提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。
GIBCO胎牛血清經(jīng)過(guò)活性炭-葡聚糖處理保存應(yīng)該注意以下幾點(diǎn):
?。?)需要長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃-70℃低溫冰箱中。
(2)熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已*解凍的血清。加熱過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分(complement)滅活。
?。?)瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過(guò)程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
?。?)一般廠商提供的血清為無(wú)菌,無(wú)需再過(guò)濾除菌。如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過(guò)濾,切勿直接過(guò)濾血清。
?。?)血清中的沉淀物 絮狀物
?。?)切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會(huì)變得渾濁,同時(shí)血清中的有效成分會(huì)破會(huì)而影響血清質(zhì)量。