ArcticZymes Technologies成立于20世紀(jì)80年代后期,總部位于挪威北部的特羅姆瑟(Tromsø)。立足北海洋區(qū),致力于從海洋生物中識(shí)別新的冷適應(yīng)酶,用于分子研究、體外診斷和治療域。ArcticZymes注于與合作伙伴和商業(yè)創(chuàng)新者建立牢固可靠的關(guān)系。因此,我們一直在探索并開發(fā)更加的產(chǎn)品,不斷滿足并且超過合作伙伴的期望。
Quality Assurance 質(zhì)量保證
我們執(zhí)行嚴(yán)苛的生產(chǎn)工藝流程,保證安全穩(wěn)定地生產(chǎn)出值得信賴的產(chǎn)品。而且,產(chǎn)品開發(fā)、生產(chǎn)、銷售和營銷過程均通過了ISO13485質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的認(rèn)證。
描述
無論是實(shí)驗(yàn)室規(guī)模樣品制備、還是生產(chǎn)規(guī)模工藝過程,去除核酸都可以改善工藝流程,如蛋白純化、病毒載體制備、mNGS中樣品處理等過程。而核酸酶的選擇,就顯得特別重要。Heat Labile-Salt Active Nuclease (熱不穩(wěn)定性耐高鹽核酸酶,HL-SAN) 是一種非特異性內(nèi)切酶,在高鹽濃度下具有佳活性;且該酶在多種緩沖液中都有活性,很容易通過還原劑處理而失活。這些特性使HL-SAN在需要去除DNA和RNA的應(yīng)用中,更為適合。
核酸污染,特別是宿主基因組DNA污染,在幾乎所有工藝流程及生物制品的生產(chǎn)中,都是需要重點(diǎn)解決的問題。一方面,宿主DNA的存在,影響目標(biāo)產(chǎn)物的純化及下游質(zhì)量分析等。另一方面,宿主DNA殘留能引起機(jī)體嚴(yán)重的免疫反應(yīng),是生物制品的關(guān)鍵質(zhì)量參數(shù),F(xiàn)DA及NMPA等對(duì)Host Cell DNA (HCD)有嚴(yán)格的質(zhì)控要求。
宿主基因組DNA中,組蛋白與DNA形成核小體,核小體緊密折疊形成結(jié)構(gòu)復(fù)雜的染色質(zhì)。組蛋白與DNA間存在強(qiáng)烈的離子作用及疏水作用,再加上特殊的結(jié)構(gòu),導(dǎo)致宿主DNA很難被準(zhǔn)確檢測并清除。已有文獻(xiàn)表明,高鹽濃度下組蛋白與DNA解離相對(duì)*,這有利于宿主DNA的檢測及去除。但市售的絕大多數(shù)核酸酶在高鹽濃度下活性很弱,甚至*失活。而耐高鹽的HL-SAN成了這類應(yīng)用的理想選擇。
高鹽濃度能夠提高去除效率
HL-SAN是一種新型的、耐高鹽的工程化內(nèi)切酶。該酶在0.5 M NaCl條件下具有佳活性,是去除宿主DNA污染的理想選擇。
鹽濃度是去除過程的重要參數(shù)。高鹽濃度下,宿主DNA與蛋白質(zhì)能夠*解離,從而更容易被降解。
推薦應(yīng)用
1. 病原微生物診斷應(yīng)用,如宏基因組測序(mNGS)樣品去除宿主DNA;
2. 蛋白純化,特別是DNA結(jié)合蛋白;
3. 病毒載體制備,如腺相關(guān)病毒(AAV)、腺病毒(AdV)等;
4. 其他需要去除宿主DNA的應(yīng)用等。
優(yōu)勢(shì)
1. 高鹽條件下,DNA清除效率更高,宿主DNA殘留更少;
2. pI為9.6,容易跟絕大多數(shù)蛋白分離;
3. 還原劑存在時(shí),酶易失活,減少對(duì)后續(xù)流程的影響
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